Srijeda Ploskirev (Bactoagar F): opis. Medicinska mikrobiologija

Okoliš Ploskirev (koji se nazivaju i Bactoagar G) jest nutrientni medij

priča

Nikolaj Ivanovich Ploskirev je sovjetski mikrobiolog i počasni doktor RSFSR-a. Rođen je 1869. godine i umro 1948. godine, a većinu svog života radio je u rodnom gradu Tomsk.

Godine 1888., on, budući znanstvenik, nije završio šesti razred škole, ušao je u vojnu službu. Studij je završio tek 1892., nakon čega je položio ispite za prijem na Sveučilište Imperijalno Tomsk, a studirao na Medicinskom fakultetu. Godine 1898. dobio je titulu liječnika.

Ploskirev je sudjelovao u rusko-japanskom ratu, a nakon toga radio je u bolnici Tomsk. Godine 1910. imenovan je za šef Tomskove dermatovenerološke bolnice, a trideset je godina bio stalna glava. Isto tako, znanstvenik je bio jedan od utemeljitelja dermatološke i veneremološke ordinacije u Tomsk.

Nikolaj Ivanovich Ploskirev napisao je niz radova posvećen borbi protiv venskih bolesti.

struktura

Srijeda Ploskirev - materijal za uzgoj crijevnih bakterija, i stoga, trebao bi sadržavati nekoliko vrsta hranjivih tvari. Proizvodi se u suhom obliku.

Heprolizat pankreasa sprat (10,4 g / l) ima prilično velik udio u ukupnoj masi. Malo manje je potrebno za dinatrij hidrogen citrat (8,5 g / l). Sadrži i suhu hranjivu juhu i mliječni šećer (8,62 i 7,3 g / l).

Drugo ime Ploskirevove okoline je Bactoagar J. Sadrži agar u količini od 6,94 g / l. Sadržaj bezvodnog natrijevog sulfata je jednak 5,1 g / l. Postoji prisutnost dehidriranog fosfatnog dinatrij - 2,1 g / l, natrijeve soli žučnih kiselina oko 3,46 g / l, te soda pepela - 2,4 g.

Manje grama sadrži indikatore - neutralno crveno (0,05) i briljantno zeleno (0,0002). Sadržaj joda iznosi 0.13.

primjena

Istraživanje biokemijskih procesa bakterija igra vrlo važnu ulogu u dijagnozi bolesti koje uzrokuju anaerobne organizme. Vrste koje čine ovu obitelj su stotine. Oni su gotovo identični morfologiji i kulturnim svojstvima, a najpouzdaniji način njihova međusobnog razlikovanja je proučavanje biokemije.

Studija počinje sjetvom patoloških materijala u hranjivom mediju. To je diferencijalno-patološka za crijevnu skupinu bakterija, a njezin sastav, uz mesno-agarni agar, uključuje indikator i laktozu. Sposobnost procesiranja laktoze važan je znak diferencijacije enterobakterija. Ako se to otkrije, pH se pomiče prema kiselosti i indikator koji mrlje koloniju pokreće se.

U drugim zemljama mogu se upotrijebiti i ostali nutrientni mediji, ali mehanizam njihova djelovanja odgovara tri najčešća u Rusiji - okruženjima okoliša Endo, Levin i Ploskirev.

Opis metode

U inozemstvu ekvivalent Ploskirevove okoline je takozvani MacConkey agar. U gotovom obliku, rješenje je prozirno, ima svijetlo ružičasto-žutu boju. Kolonije koje mogu obraditi laktozu u Ploskirevovom mediju dobivaju crveno (brusnica). Ako bakterija ne može obraditi, kolonija je ili bezbojna ili slaba u boji.

S obzirom na činjenicu da sastav Ploskirevove sredine uključuje tvari koje inhibiraju (dijamantno zeleno, želučane soli, jod) gotovo potpuno potiskuje rast Gram-pozitivne flore, a prvi dan značajno inhibira rast eshechirije, kao i druge uobičajeno prateće mikroflore.

Druga faza

Zatim slijedi izbor kolonije interesa, a zasijava se na primarnu diferencijaciju i akumulacijski medij. Mediji na kojima nastaje sjemenje moraju sadržavati nekoliko supstrata. Bakterijska kultura treba otkriti enzimsku aktivnost prema njima, osim medija se nalaze u epruvete tako da postoje dva dijela:

• onaj na kojem je agar spušten;
• s stupcem.

Kolonija koja interesira istraživača popunjena je na nagnutom dijelu s gustom moždanom kapom, au stupcu - s pištoljem. U ovoj fazi koriste se mediji Russell, Kligler ili Olkenitsky. Kao diferencijalno-dijagnostički, koristi se i Ploskirevjev medij.

Mikrobiologija i patogeni

Ploskirevov agar je važan čimbenik u otkrivanju infekcija uzrokovanih enterobakterijama. Tako, na primjer, raste i razlikuje kolonije mikroorganizama, koji su uzročnici bakterijske dizenterije. To su anaerobni organizmi koji ulaze u rod Schigella.

Kao i svi koji su dio obitelji crijevnih bakterija, Shigella su vrsta šipki, veličine dva mikrometra. Ne stvaraju kapsule i spore, nemaju flagella - to im omogućuje da se razlikuju od salmonele, što je pak mobilno. Oni savršeno rastu na najjednostavnijim sredinama, pri temperaturi iznad sobne temperature (35-37 ° C) i 7.4 pH. Po prirodi rasta, kolonije se ne razlikuju od salmonele.

Kao što je gore navedeno, mikroorganizmi mogu imati praktički nikakve morfološke razlike, ali se značajno razlikuju u biokemijskim procesima vitalne aktivnosti. Dakle, osim Shigelle Newcastle, fermentacija ugljikohidrata je stvaranje kiseline bez plina. Uz izuzetak shigella Sonne, oni ne mogu fermentirati laktozu, već razgraditi glukozu. Samo zbog njihovih ključnih karakteristika može se pripisati činjenici da oni mogu smanjiti mračnu reakciju na nitrit. Njihove kolonije ne cijepaju ureu, a u hranjivom mediju nema ukapljenja želatine.

Prikupljanje i priprema inokuluma

Za otkrivanje patogena dizenterije, potrebne su mikrobiološke studije zaraženih medija, tj. Pokreta crijeva pacijenta. Nakon primitka materijala, potrebno je sijati što je prije moguće. Ako to nije moguće, izvor treba staviti u konzervans - smjesu fosfatnog pufera ili glicerin. Na temperaturi od 4 ° C mogu se čuvati najviše jedan dan. Sakupljanje materijala mora se obaviti rektalnom staklenom cijevi, koja se umetne u rektum.

Za ispitivanje materijala odabiru se gnojne sluznice, koje se moraju prati u dvije ili tri epruvete izotonične otopine natrijevog klorida.

Primjena patogenih bakterija u Ploskirevov medij dobiva se staklenom špatulom. Potrebno je u malom prostoru trljati ga u agar, a zatim odstraniti spatulu iz medija, a preostali materijal treba utrljati u nepropusnu površinu. Ako se sjetimo u nekoliko šalica, svako od njih treba posijati novim dijelom.

Ako mucopurulentni dijelovi ne postoje u izlučevanju za analizu, to ne znači da patogeni mikroorganizmi nisu prisutni. U tom slučaju potrebno je oponašati izmet u 10 ml otopine natrijevog klorida (koncentracija 0,85%), a zatim staviti jednu ili dvije kapi na Ploskirev medij. Emulgirana stolica može se posijati u selenitnoj juhu. Koristi se i ako postoje povraćanje ili voda za pranje umjesto izmeta.

Mikrobiološka dijagnostika

U prvoj fazi mikrobiološkog istraživanja, patogene bakterije se zasijavaju u dvije šalice, a zatim promatraju kako šigela raste. Na Ploskirevovom mediju proizvodi se jedan usjev, drugi je na mediju Levin ili Endo.

S obzirom na pojavu sojeva Shigele otpornih na antibiotike, levomicetin se dodaje mediju. Tada se unutar 24 sata inkubira u termostatu pri temperaturi od 37 ° C.

Drugi dan trebate proučavati odrasle kolonije. Oni koji se ne razvijaju bez boje na diferencijalnoj dijagnostičkoj okolini, moraju se izrezati iz Russellovog medija ili kratke serije "motley". Daljnja istraživanja provode se prema algoritmu primarnih usjeva na njima. Kolonije šigele na Ploskirevovom mediju rastu u obliku prozirnih, bezbojnih i malih stupova. Oni su od dvije vrste:

• spljošten s trbušnim rubovima;
• Zaobljeni, konveksni, s karakterističnim vlažnim sjajom.

Tri ili četiri kolonije moraju se mikroskopirati i ispitati radi pokretljivosti. U slučaju da se potonja ne pronađe, oni se preseljavaju u Olkenitskyn okoliš kako bi se izdvojila čista kultura. U nedostatku karakterističnih kolonija shigele, ili ako uopće nema rasta, potrebno je proizvesti selenitnu juhu na Endo ili Ploskirev agar. Ako su tipične kolonije prisutne u dovoljnim količinama, stavlja se približna reakcija aglutinacije. Koristi se smjesa sera Sonne i Flexnera, reakcija se odvija na staklu.

Daljnja istraživanja

Trećeg dana zabilježene su promjene koje su se dogodile u kolonijama na području Russellia. Ako postoji kultura koja se ne razgrađuje laktoza, a glukoza se fermentira formiranjem kiseline, odvaja se i ispituje, provodi mikroskopiju, a također se provodi sjetva na "skučenu seriju", ali ovaj put se primjenjuje. Na isti način se provodi aglutinska provjera u svrhu serološke identifikacije.

Posljednjeg dana možete zaključiti na osnovi promjena u seriji "serija" (bilo da se fermentacija ugljikohidrata odvija), kao i rezultati reakcije aglutinacije.

Skladištenje i priprema

Priprema Ploskirev agara je kako slijedi:

1. 55 g suhe tvari se miješa u litru destilirane vode.
2. Kuhajte dvije do tri minute, sve dok se agar potpuno ne rastopi.
3. Ulijte u Petrijeve posude (sterilnost je obavezna) s slojem od 5-6 mm.
4. Šalice ostaju otvorene sat i pol na sobnoj temperaturi (18-25 stupnjeva). Na kraju tog vremena medij će se zamrznuti i osušiti dovoljno.

Okoliš Ploskirev je svjetlosno osjetljiv i higroskopan. Prašak mora biti pohranjen u zapečaćenoj ambalaži, relativna vlažnost zraka u sobi ne bi trebala prelaziti 60%. Optimalna temperatura skladištenja od 2 ° C do 25 ° C Potrebno je pridržavati se ovih pravila za pohranu, inače se mogu pojaviti netočni rezultati istraživanja.