Radioimunska analiza u mikrobiologiji: primjena, mehanizam

Moderne medicine ima određene načine dijagnoze koji omogućuju postavljanje etiologija bolesti kod ljudi na temelju određivanjem patogena genetski stranih tvari koje stimuliraju imuni odgovor, nukleinske kiseline, kao i pomiče imunološki i alergijske prirode koji se javljaju zbog djelovanja. Danas se RIA naširoko koristi u imunologiji i virologiji, odnosno radioimunološkom ispitivanju, ciljevima formulacije, komponenti, čiji se put razmatramo u ovom članku. Ova analiza je u stanju otkriti antigene kao rezultat njihove interakcije s protutijelima.

definicija

RIA je metoda za dijagnosticiranje tih biološki aktivne tvari u tjelesnim tekućinama, koji se temelji na reakciji antigen-antitijelo, uz korištenje radionuklida označene spojeve njima analogni koji imaju sposobnost specifičnog vezivanja sustava. Nakon njihove interakcije formira se imunološki kompleks, koji se odvaja i proučava radi radioaktivnosti. Poznato je to imunoradiometrijski test provodi se korištenjem standardnih setova za reagens.

Svaki reagens može odrediti koncentraciju jedne određene tvari. Biološka tekućina uzeti iz čovjeka je pomiješan s reagensom, nakon razdoblja inkubacije, odvajanje vezanog i slobodnog radioaktivnih materijala dalje provodi radiometrija i izračun rezultate. Za označavanje tvari koristi se izotop joda. Označeno je i dodano u određenom iznosu.

primjena

Primjena radioimunološke analize ima širok u medicini i mikrobiologiji. Pomoću nje provodi se dijagnoza bolesti srca i krvožilnih bolesti, bolesti endokrinih i drugih tjelesnih sustava. Također, RIA se često koristi za prepoznavanje uzroka neplodnosti, patologije razvoja fetusa. U onkologiji, ova analiza se provodi kako bi se odredili markeri neoplazmi kako bi mogli pratiti učinkovitost liječenja. U imunologiji, RIA se upotrebljava za proučavanje prisutnosti imunoglobulina, enzima, proteina i tako dalje u krvi. Danas, ova analiza omogućuje vam da identificirate koncentraciju različitih hormona na milijunti dio jednog grama. Na taj način, Test krvi imuno testnaširoko koristi u kardiologiji, onkologiji, endokrinologiji, ginekologiji i virologiji.

RIA metode

Prihvaća se razlikovanje nekoliko metoda analize, ovisno o prirodi reakcije:

1. Nekonkurentna metoda naznačen reakcijskih komponenata kao standard i definiranih antigena, pufera, antitijela koja se izotop oznakom, specifična antitijela koja se vežu na sorbensa. Antigen se dodaje protutijelima koji se ispituju. Nakon inkubacije pojavljuju kompleksa antigen-antitijelo, ispere sorbent je dodano obilježeno antitijelo koje dolazi u kontakt s antigenom u kompleksu. Radioaktivnost ovisi o koncentraciji antigena, koja se istražuje.
2. Konkurentski radioimunološki test je zbog konkurencije antigena. Ovdje postoje reakcijske komponente kao što su kontrola i detektibilni antigeni, puferska otopina, određena antitijela koja se vežu na sorbent, kao i antigen obilježen izotopom. Dijagnoza započinje injekcijom antigena, koji se istražuje. Na sorbentu nastaje kompleks antigena i antitijela. Zatim, sorbent se opere i obilježeni antigen se uvodi. U tom slučaju dolazi do kontakta s protutijelom. Pomoću brojila, izmjerena je reakcija i radioaktivnost. To će biti obrnuto proporcionalno količini antigena u uzorku.
3. Neizravna metoda je najčešći. U ovom slučaju radioimune analize komponenata Reakcija ima takav kao kontrolni i test serum, antigene ili antitijela koja su vezana za sorbent, protutijela obilježena izotopima, puferske otopine. Protutijela ili antigeni koji se dijagnosticiraju reagiraju s antigenom ili antitijelima koja su vezana za sorbent. Zatim se ukloni inkubat, uvede se obilježena antitijela koja se vežu na komplekse antigen-antitijela.

Metoda analize

Dakle, radioimunska analiza se provodi uz pomoć posebnih reagensa. Skupovi su standardni, stoga se ne dopuštaju pogreške ili nepravilnosti. Rezultati dijagnoze su pouzdani. Analiza se provodi ujutro, u tu svrhu osoba uzima vensku krv. U laboratoriju se serum odvaja od krvi, koji će se koristiti za RIA. Ovaj serum je pomiješan s reagensima. Dobivena smjesa se inkubira pri određenoj temperaturi u termostatu.

Dobivena smjesa odvojena je slobodnim i vezanim izotopima. Nakon toga se ispituje primljeni materijal, a rezultati se izračunavaju. Mehanizam radioimunološkog ispitivanja ima nekoliko varijanti. Gore opisani postupak je RIA tekuća faza, budući da sve komponente imaju tekuće stanje. Postoje RIA i krute faze, gdje se antitijela stavljaju u nosač koji se ne otapa u tekućini.

Dostupnost dijagnostike

Koristeći ovu metodu dijagnoze u medicini svake godine postaje sve popularnija. nedavno, imunoradiometrijski test postaje standardna metoda dijagnoze koju liječnik može odrediti prilikom donošenja konačne dijagnoze. Već dugo vremena ova vrsta analize je provedena samo u laboratorijima, danas je postala obična metoda istraživanja. No, RIA zahtijeva upotrebu skupe opreme (gama brojači), a setovi reagenata imaju kratko razdoblje. Sve to je glavni nedostatak takve analize, koja određuje njegovu skupu cijenu.

Osim toga, nedavno je RIA počeo zamijeniti suvremene metode istraživanja koje ne zahtijevaju interakciju s izotopima. Takve zabrinutosti enzimski imunoanalizu. Dakle, RIA je dobrodošla u mnogim klinikama. U velikim gradovima i dijagnostičkim centrima već je odavno korišten, ali u običnim bolnicama u malim gradovima ova analiza gotovo se ne koristi zbog visokih troškova.

Prednosti RIA

Radioimunska analiza ima mnoge prednosti. To je posve specifično i ima veliku osjetljivost, što omogućuje utvrđivanje prisutnosti biološki aktivnih tvari u nevjerojatno malim količinama. Ova analiza je vrlo jednostavna, osobu je potrebno samo proći vensku krv. Rezultati testa su 100% točni i spremni sljedeći dan. Također, RIA se lako može automatizirati. Dakle, ova analiza omogućuje nam da prepoznamo proteine ​​koji su proizvodi vitalne aktivnosti zaraznih bakterija, što ukazuje na prisutnost infekcije u tijelu.

Dijagnoza u Virologiji

Najpovoljniji RIA je za virologiju, jer omogućuje kratko vrijeme da identificira virusne patogene. To je zbog činjenice da se u posljednje vrijeme povećava učestalost različitih infekcija, koja se širila na visokoj stopi, uzrokujući smrt među ljudima. To se posebno odnosi na zemlje koje nemaju visok društveni i gospodarski razvoj (Daleki Istok), ovdje je jednostavno nezamjenjiv imuno test. mikrobiologija Također se primjenjuje ova dijagnostička metoda za otkrivanje zaraznih bolesti koje uzrokuju patogene bakterije. Na primjer, RIA se široko koristi za otkrivanje tifusne groznice. U prvim danima bolesti prije imenovanja liječenja potrebno je proučiti stolicu i povraćanje. Međutim, rezultati dijagnoze će se dobiti nakon dugo vremena. Ovdje RIA dolazi u spašavanje, analiza omogućava identificiranje patogena bolesti u kratkom vremenu. Osoba daje krv, sutradan su rezultati studije već spremni. Ova analiza pomaže u formulaciji točne dijagnoze.

rezultati

Radioimmunoassay je trenutno jedna od najosjetljivijih metoda dijagnoze. Koristi se za analizu bilo koje supstance protiv koje se mogu proizvesti protutijela. Ova metoda omogućuje učiniti mnogo pokušaja u malom volumenu tekućine i što je prije moguće izvršiti popis rezultata, kao što se može u potpunosti automatiziran. Ova je analiza izrađena pedesetih godina prošlog stoljeća od strane Solomona Bersona. Trideset godina kasnije postalo je rasprostranjeno. Do danas, RIA nema 100 posto alternative, jer analiza ima visoku osjetljivost. RIA se koristi u različitim granama medicine, kao iu mikrobiologiji i virologiji.

Napokon

Korištenje metode u virologiji danas je vrlo relevantno, jer pruža mogućnost da istraži širenje infekcija, da se precizira dijagnoza i da propisuje specifičan tretman. Posebno je ovaj problem relevantan za zemlje koje imaju nisku razinu gospodarstva i društveni razvoj. Također, ova analiza omogućuje vam prepoznavanje broja hormona i enzima u ljudskom tijelu. Kako bi se postigli pouzdani rezultati, ispitivač treba samo donirati krv za analizu. Medicina ne prestaje, zajedno s radioimunološkim ispitivanjima pojavljuju se nove metode istraživanja, no RIA i dalje ostaje jedna od vodećih u medicinskoj dijagnostici.