Što je EIA? Metoda enzimskog imunoanalize: suština, princip, nedostaci

Za provođenje sveobuhvatne procjene stanja tijela primjenjuje se ELISA metoda provođenja dijagnostike. Enzimski imunotest je dizajniran za dijagnozu infektivnih, hematoloških, primarnih i sekundarnih imunodeficijenata.

Što je ELISA analiza?

Mnogi pacijenti su zainteresirani za ELISA metodu: što je to, koja je svrha studije. Nedavno je počela upotrebljavati imunoenzimatsku analizu. U početku je korišteno za proučavanje antigenskih struktura, a provedeno je samo u znanstvene svrhe. Tada su znanstvenici došli do zaključka da je uz pomoć enzima moguće identificirati specifična protutijela koja nastaju kao odgovor na tekuću bolest.

U početku, ovu tehniku ​​koristili su samo usko specijalizirane medicinske ustanove, uglavnom na stanicama transfuzije krvi. Od posebne važnosti je ELISA metoda za otkrivanje HIV infekcije.

Do danas, ova metoda ima širok opseg. Moderni laboratoriji ga koriste za dijagnozu:

• tumori;
• hormonalni poremećaji;
• infekcije;
• kronični ili prethodni zarazni procesi;
• helminta.

Ako tijelo ima zarazni proces, onda se ova vrsta dijagnoze smatra najoptimalnijim za određivanje vrste bolesti.

Bit metode i njene vrste

ELISA metoda - što je to, koja je bit ovog tipa istraživanja? Ovo i mnoga druga pitanja su od interesa za pacijente. Temelj ove metode dijagnoze je vezanje imunoloških stanica tijela s antigenom patogenih infekcija. Dobiveni kompleks određen je posebnim enzimom.

Da biste razumjeli načelo ELISA metode, morate znati kako dolazi do reakcije antigen-antitijela. Antigen je molekula proteinskog podrijetla, izvanzemaljac tijela, koja prodire u infekciju. Čestice stranih krvi koje se ne podudaraju u skupini također se smatraju antigenom. U tijelu izazivaju imunosnu reakciju usmjerenu na zaštitu od stranih supstanci. Stoga, ljudsko tijelo proizvodi protutijela - imunoglobuline, sposobne se povezati s antigenom, stvarajući imuni kompleks. Takvi spojevi su mnogo lakše prepoznati i uništeni stanicama imuniteta.

Reakcija na prisutnost takvih imunoloških kompleksa provodi se u laboratorijskim uvjetima, koristeći već pripremljene spojeve kako bi se utvrdilo postoji li slična u krvi.

Metoda je vrlo jednostavna ELISA, no s obzirom na činjenicu da je test krvi učinio da provjerite za mnoge infekcije i bolesti, postoji nekoliko varijanti toga. Svaki od njih razlikuje se po svom izgledu i opsegu. Može biti izravna ili neizravna ELISA. Izravna metoda podrazumijeva da imobilizirana protutijela reagiraju s antigenom. Glavna prednost ove metode je da se svi procesi mogu automatizirati, što znači da dijagnoza traje malo vremena.

Neizravna metoda podrazumijeva korištenje antitijela sekundarne prirode. I antigen je imobiliziran na čvrstoj fazi. Analiza vam omogućuje prepoznavanje antitijela na različite antigene. To pomaže postići točniji rezultat, ali metoda je složena.

Prednosti istraživanja

Laboratorijsko istraživanje ELISA metoda ima mnoge prednosti u usporedbi s drugim dijagnostičkim metodama. Glavni su:

• visoka osjetljivost;
• stabilnost u skladištenju sastojaka;
• brzina dijagnostike;
• može se upotrijebiti mala količina ispitivanog materijala;
• postoji mogućnost automatizacije svih procesa;
• infekcija se može identificirati u najranijim fazama.

Ova metoda dijagnoze je univerzalna pa je prikladna za provođenje ankete o masovnosti. Pomoću analize moguće je pratiti dinamiku tijeka infektivnog procesa.

Indikacije za analizu i uzorkovanje

Provođenje studije pomoću ELISA metode može se propisati za sumnju na mnoge bolesti:

• akutne i kronične infekcije, veneralne bolesti;
• prisutnost parazita;
• autoimune patologije;
• onkološke bolesti;
• za određivanje razine hormona.

Prisutnost protutijela ispitana je za vensku krv. Prije analize izolira elemente koji mogu komplicirati studiju. Također se mogu uzorkovati i druge biološke tekućine.

Da biste dobili najtočnije informacije, uzimanje krvi se provodi na prazan želudac. Ako je postupak propisan za određivanje latentne infekcije, a zatim nekoliko tjedana prije analize, trebate prestati uzimati antibakterijske i antivirusne lijekove. Ovisno o opremi laboratorija gdje je materijal prikupljen, rezultat se može dobiti u roku od 24 sata. U hitnim slučajevima ovaj put se svodi na nekoliko sati.

Analiza sifilisa

Korištenje ELISA metode pomaže u određivanju prisutnosti mnogih infekcija u tijelu, posebice i sifilisa. Za proučavanje, krv iz vena se uzima na prazan želudac. Zatim istraživanje kako bi se utvrdilo ne samo prisutnost bolesti u tijelu, ali točno vrijeme svog početka, kao u tijeku bolesti nekih antitijela su zamijenjene drugima u vrlo specifičnom cilju.

U akutnoj fazi, što pokazuje produljeno tijek bolesti, ili imunoglobulini kao M. će se detektirati u krvi tijekom pogoršanja kroničnog infekcije prisutnosti tipa imunoglobulina A pokazuje da je infekcija se nalazi u tijelu za više od 4 tjedna. Imunoglobulini skupine G govore o toplini bolesti ili bolesti ili o ranijoj provedenoj terapiji.

Prema stupnju boja bunara, procjenjuje se intenzitet tijeka infekcijskog procesa, budući da njegova zasićenost ovisi o broju formiranih imunoloških kompleksa.

Analiza za HIV infekciju

ELISA metoda se također koristi za analizu HIV infekcija. dijagnostika u ovom slučaju ima određene značajke koje su povezane s tijekovima i napredovanjem bolesti. Ova metoda ispitivanja smatra se najprihvatljivijim za određivanje, ali se mora provesti najranije mjesec dana nakon izlaganja faktorima rizika. To je zbog prisutnosti razdoblja inkubacije, u rasponu od 45 dana do 6 mjeseci. Zato se analiza treba ponoviti za šest mjeseci.

Pozitivan rezultat se smatra ako su antitijela pronađena u početnoj studiji. U ovom slučaju, analiza se ponavlja šest mjeseci kasnije, ako je rezultat opet pozitivan, tada se studija provodi pomoću vrlo specifičnih testnih sustava.

Analiza parazita

Dosta često, liječnici propisuju enzimski imunoanalizu kako bi utvrdili prisutnost parazita u tijelu. Koristeći ovu metodu istrage, možete odrediti:

• Ascariasis;
• giardijaza;
• toksoplazmoza itd.

EIA-dijagnostika krvi koristi se za otkrivanje parazita i proizvoda njihove vitalne aktivnosti, kao i imunoglobulina. Učinkovitost ove metode iznosi 90% i pomaže u praćenju dinamike razvoja procesa.

Nedostaci metode

Usprkos svim prednostima, postoje i nedostaci ELISA metode. Glavni nedostatak je da tijekom istraživanja liječnik mora unaprijed predvidjeti bolest.

u dijagnoza zaraznih bolesti Nije moguće slučajno pronaći patogena i odrediti njezine imunoenzimatske osobine. Test samo ukazuje na prisutnost protutijela u pacijentovoj krvi. Osim toga, to je prilično skupe analize.

Objašnjenje analize

Rezultat kvalitativne ELISA-e biti će ili prisutnost protutijela, ili njihova odsutnost u krvi. Ako se provede kvantitativna analiza, koncentracija protutijela može se izraziti ili u digitalnoj vrijednosti ili u određenom broju znakova +.

Osim toga, analiziraju se sljedeći pokazatelji:

• IgM;
• IgA;
• IgG.

Indeks IgM ukazuje na tijek akutnog zaraznog procesa u tijelu. Potpuno odsutnost može govoriti o odsutnosti uzročnika bolesti ili njezinom prijelazu na kroničnu fazu.

Indeks IgA s negativnim rezultatom ispitivanja za IgM ukazuje na kroničnu ili latentnu infekciju. Istovremena prisutnost IgM i IgA sugerira da je bolest u akutnim fazama. Prisutnost IgG ukazuje na prijelaz bolesti u kroničnu fazu ili potpuni oporavak i razvoj imunosti.

Sada postoje posebni ELISA testovi koji se mogu sami izvesti.