Pravila za određivanje tipa krvi prema ABO sustavu

Postupak za određivanje krvnih grupa ABO sustav za prepoznavanje antigena A i B u eritrocitima standardnim korištenjem antitijela i aglutinini u plazmi ili serumu analiziran standardnim krvi eritrocitima. Tehnika je razvijena početkom 20. stoljeća i još se aktivno koristi u medicini. Određivanje antigena A i B je zbog Colyclons anti-A i anti-B.

Osnovni pojmovi

Donatori uvijek određuju ne samo antigene u eritrocitima već i aglutinine u serumu (plazmi) primjenom standardnih eritrocita. Venska krv koristi se kao biomaterija. Prije testiranja, morate odreći masne hrane dan prije testa i ne pušiti pola sata prije nego što uzmete test. Grupe krvi određuju se dva puta: prvo u odjelu za liječenje, gdje se materijal bere, a zatim potvrdio studija u laboratoriju.

Definicija krvnih skupina prema ABO sustavu glavni je test koji se koristi u transfuziologiji. Također, u nekim životinjama postoji sličan sustav krvnih skupina, na primjer u čimpanzama, gorilama i bonobama.

Povijest otkrića

U znanosti, općenito je prihvaćeno da je metoda određivanja krvne grupe ABO sustava otkriven je prvi put Karl Landsteiner, austrijski znanstvenik, 1900. godine. Zatim je opisao u svom djelu tri vrste antigena. Tijekom da je trideset godina kasnije dobio je Nobelovu nagradu za medicinu i fiziologiju. S obzirom na činjenicu da je između znanstvenici nisu bili bliski veze, a kasnije je utvrdio da je češki liječnik Jan Jansky serološki bez obzira na istraživanja Karl Landsteiner prvi opisao četiri skupine ljudske krvi, ali njegova istraživanja nisu bili poznati široj publici. Trenutno, to je klasifikacija razvijen od strane J. Jansky, koji se koristi u Rusiji i bivšim sovjetskim republikama. U SAD-u je WL Moss stvorio sličan rad 1910. godine.

Metoda određivanja krvnih skupina prema ABO sustavu korištenjem tsoliklonova

Krvnu skupinu treba odrediti u sobi s dobrom rasvjetom, promatrajući raspon temperature od 15 do 25 stupnjeva Celzijusa, budući da odstupanja od ove norme mogu utjecati na rezultate studije. Inicijale i prezime pacijenta napisane su na pločici ili ploči. S lijeva na desno ili oko kruga primjenjuje se standardna oznaka za skupine (O (I), A (II), B (III)). Ispod njih se odgovarajuće serume stavljaju kap po kap zasebnim pipetama za svaku vrstu. Onda im je dodana krv pacijenta. Materijal za istraživanje je preuzet iz usnice ili prsta. To zahtijeva tehniku ​​određivanja krvne grupe prema ABO sustavu.

Također je ispravno koristiti crvene krvne stanice u epruveti nakon ugrušaka. Potrebno je da količina seruma bude više od količine dodane desetke krvi. Nakon toga, kapi se miješaju sa staklenim štapićima (zasebno za svaki). U roku od pet minuta, lagano ljulja pločica, promatrajući pojavu reakcije hemaglutinacije. Nalazi se u činjenici da se pojavljuju male crvene grudice, spajajući se u veće. Serum u ovom trenutku gotovo potpuno gubi boju.

Da bi se uklonila lažna hemaglutinacija jednostavnog lijepljenja crvenih krvnih zrnaca, nakon tri minute dodajte jednu kapljicu slane otopine i provjerite je li aglutinacija ostala. Ako je tako, onda je istina. Sve, definicija krvnih skupina prema ABO sustavu na ovom je završena.

Tumačenje rezultata

Kao rezultat, mogu biti četiri reakcije:

• nema aglutinacije s bilo kojim serumom - prvom skupinom O (I);
• reakcija se očitovala sa sera I (ab) i III (a) - druga skupina A (II);
• aglutinacija se javlja s serumima I (ab) i II (b) - trećoj skupini B (III);
• Ako se reakcija odvija u tri seruma, potrebno je provesti dodatnu proceduru sa skupinom kemikalija AB (IV), koji su standartnymi- ako aglutinacije na takav pad nedostaje, može se pretpostaviti da je četvrti krvna grupa AB (IV).

Express metoda Rh faktora

Metoda određivanja krvnih skupina prema ABO sustavu pretpostavlja simultano otkrivanje Rh faktora (Rh).

Površina ploče je prethodno navlažena i na njemu piše "kontrolni serum" i "antiresus serum". Zatim se ispod natpisa stavljaju jedna ili dvije kapljice potrebnih reagensa, a njima se dodaju analizirani materijali. U tu svrhu se također mogu koristiti krvi iz prsta (u istom iznosu kao volumena seruma) ili koje su preostale u dnu cijevi nakon pojave ugruška (pola volumena seruma) crvenih krvnih stanica. Ne utječe na izbor materijala za konačni rezultat. Zatim se krv i serum pomiješaju sa suhom staklenom šipkom, nakon čega čekaju da se reakcija odvija pet minuta. Da bi se uklonile lažne očitanja, nakon tri do četiri minute, dodaje se izotonična otopina natrijevog klorida (samo nekoliko kapi). Često se provodi određivanje krvne grupe prema ABO i Rh sustavu.

Ako se pojavi aglutinacija eritrocita u kapi s serumom, to ukazuje na pozitivni rebro krvi. Prema statistikama, Rh + javlja se u 85% svjetske populacije. Nedostatak nam omogućuje da govorimo o Rh-negativnoj pripadnosti. Ako se aglutinacija pojavila u kontrolnom serumu, postala je neupotrebljiva. Nažalost, algoritam za određivanje krvne grupe prema ABO sustavu neprestano radi savršeno.

Koje se pogreške može napraviti s ovom tehnikom?

Netočnoće u određivanju krvi pripadaju određenoj skupini ovise o sljedećim razlozima:

• Tehnička.
• Biološka specifičnost krvi.
• Nepotpuna priroda standardnih seruma i eritrocita.

Tehničke pogreške

Moguće pogreške u određivanju krvne grupe ABO sustava na križ način:

• Neispravan serum na ploči.
• Pogrešni kvantitativni omjeri materijala.
• Koristeći dovoljno čiste posude ili ploča koje su u dodiru s krvi (svaki serum treba biran odvojeno Pipeta se ispere s otopinom natrijevog klorida (0,9%) koncentracija).
• Nepravilno snimanje analiziranog materijala.
• Neispunjavanje vremena potrebnog za početak aglutinacije - ne smije biti žuriti i uzeti u obzir reakciju prije isteka pet minuta jer krv može imati slabe aglutinogene. Pretjerivanje je također neophodno, jer kapljice mogu sušiti od rubova i dovesti do lažnog zatvora. Važno je slijediti pravila za određivanje krvne grupe prema ABO sustavu.
  
• Pogrešna centrifugacija također može dovesti do pogrešnog rezultata.
• Temperatura zraka koja prelazi dopuštena, utječe na odsutnost aglutinacije. Da biste izbjegli pogreške takve vrste, trebate koristiti poseban serum koji je dizajniran za rad u vrućim podnebljima. Odredite skupine krvi na ploči ili ploči, čija vanjska površina pada u hladnu vodu.

Pogreške biološke specifičnosti

Pogreške povezane s biološkom specifičnošću analizirane krvi podijeljene su u dvije vrste.

• Ovisno o karakteristikama crvenih krvnih stanica.
• Pogreške zbog biološke osobine seruma.

Razmotrimo svaku vrstu detaljnije.

Ovisno o karakteristikama crvenih krvnih stanica

• Kasna aglutinacija, zbog "slabih" oblika eritrocita i antigena. Kako bi se izbjegle pogreške, potrebno je odrediti krvnu skupinu donatora i primatelja koji koriste standardne eritrocite. Odredite aglutinogen A₂ treba preispitati s drugim vrstama reagensa i ostalih jela, što povećava vrijeme snimanja reakcije.
• "Panaglutinacija" - sposobnost krvi da pokaže istu reakciju nespecifičnog karaktera sa svim serumima, uključujući i svoje. Nakon pet minuta, oštrina takve aglutinacije slabi, iako se treba intenzivirati. Slični slučajevi javljaju u pacijenata oboljelih od raka, spaljena i drugih. Kao kontrola, potrebno je procijeniti izraz aglutinacije crvenih krvnih stanica koje se analiziraju u standardnom serumu četvrte skupine i slane. Kada je "panaglutinacija" krvna grupa određena kao posljedica trostrukog pranja crvenih krvnih stanica. Ako se ne dobije željeni rezultat, potrebno je ponovno ograda uzorka krvi u epruveti zagrijati prije postupka i staviti uzorak u hladnu kutiju, kako bi se održavati temperaturu od 37 stupnjeva Celzija i iznad. Potom treba isporučiti u laboratorij gdje se održava gore navedena temperatura i zagrijava fiziološka otopina, ploča i reagensi.

• Ponekad se crvene krvne stanice u krvi koji se analiziraju raspoređeni su kao "stupovi novčića" i mogu se uzeti kao aglutinati. Ako dodate dvije kapi izotonične otopine i lagano protresite tanjur, crvene krvne stanice uzeti ispravnu poziciju.
• Nedovršena ili miješana aglutinacija koja se javlja u bolesnika s drugom, trećom i četvrtom skupinom kao rezultat transplantacije koštane srži ili u prva tri mjeseca nakon transfuzije krvi 0 (I).

Zbog biološke osobine seruma

• Tijekom rutinskog testiranja otkrivena su protutijela različite specifičnosti kao rezultat prethodne senzibilizacije. Moramo ga odrediti i pokupiti crvene krvne stanice bez sadržaja antigena na koji se otkriva imunizacija. Primatelj mora nužno odabrati kompatibilnu krvnu donatora pojedinačno.
• Nema antitijela A i B, koja se primjećuje kod novorođenčadi i pacijenata koji pate od ugnjetavanja humoralnog imuniteta.
• Kod formiranja "kovanica" abnormalni rezultat treba potvrditi uzimanjem standardnih crvenih krvnih stanica prve skupine. Otopina natrijevog klorida i ljuljanje ploče pomoći će razlikovati prave aglutinate i "kovanice".
  

Pogreške povezane s primjenom inferiornih standardnih eritrocita i sera

Slabi serumi s prošlošću vremena ili titar manji od 1:32 mogu pokrenuti slabu i kasnu aglutinaciju. Korištenje takvih reagensa je neprihvatljivo.

Koristeći standardne eritorcita neuporabljivim ili sera proizvesti pod ne-sterilnim uvjetima i konzervirana nedovoljno, dovodi do pojave „bakterijski” aglutinacije ima nespecifičnu prirode.

Postoje mnoge popularne pretpostavke o krvnim skupinama ABO sustava, koje su se pojavile odmah nakon otkrivanja u različitim svjetskim kulturama. Tako, na primjer, u tridesetima prošlog stoljeća u Japanu i nekim drugim zemljama, teorija koja je povezivala grupu krvi s jednom ili drugom vrstom osobnosti dobila je popularnost. Slične teorije danas su popularne.

Tu je i vjerovanje da je osoba sa skupinom A, podliježe teškim mamurluka, o je povezana s dobrim zubima i skupine A2 - s najvišim razinama inteligencije. Ali takve tvrdnje nisu znanstveno dokazane.

Ispitali smo definiciju krvnih skupina pomoću ABO sustava koristeći standardne serume.