Metode za postavljanje reakcije taloženja

Ovaj će članak biti posvećen fenomenu reakcije padavina. Ovdje ćemo razmotriti značajke izjave ovog fenomena, fenomen difuzije, opću karakteristiku, ulogu u ljudskom životu i još mnogo toga.

Upoznavanje s fenomenom

Precipitacija je fenomen seroloških tipa, tijekom kojeg topivi antigeni djeluju u interakciji s antitijelima i kao rezultat dolazi do precipitacije precipitata - precipitata.
Opća karakterizacija reakcije taloženja je oblik konzistentnog učinka antigena i antitijela. Ovakvi tipovi interakcije omogućuju određivanje prisutnosti nepoznatih antigena u ispitivanoj tvari dodavanjem poznatih protutijela i antigena. Proces taloženja bez prisutnosti soli će biti lošiji, a najbolji optimalni leži u rasponu od 7,0-7,4 pH.

Složeni elementi reakcije

Među sastojcima reakcije padalina razlikuju se tri glavna elementa:

1. Antigen koji ima molekularnu prirodu. To je u stanju sitnog raspršenog tipa, drugim riječima, topljiv. I također zove pretsipitogenom takav antigen, koji je produkt raspadanja tkiva ili ekstrakt, i drugi. Pretsipitogen ima karakterističan razliku od agglutinogen koja leži u veličini čestica od kojih se sastoji. Agglutinogen svojstvenu veličinu stanica i pretsipitogeny razmjerno s veličinom molekule. Otopina antigena karakterizira prozirnost.
2. Antitijela koja se nalaze u serumu ljudske krvi, kao iu imunološkom dijagnostičkom serumu, koji sadrži ispitivana protutijela.
3. Elektroliti su otopina natrij klorida, koja je izotonična.

Priprema precipitogena

Formulacija reakcije taloženja je nemoguća bez precipitogena, koja se dobiva mljevenjem materijala i ekstrahira antigene prirode proteina od njih. Ekstrakcija se vrši kuhanjem ili drugim sredstvima.
Glavni primjer su pretsipitogenov lizati, te tkiva i organa ekstrakti, serum, razne vrste filtrati se temelji na tekuće kulture mikroorganizama, kao i fiziološku otopinu ekstrakta mikroorganizama i autolizatnye tvari.

Stajanje u oborina

Sada razmotrimo metodu postavljanja reakcije padavina.
Provedena je reakcija taloženja prstena, koja se odvija u posebno pripremljenim epruvetama. U šupljini posuđa dodajte serum, zalivši ga kroz zid vrškom pipete. Dalje, odozgo točno proizvodi slojevanje odgovarajuće količine precipitogena, a zatim se cijev dovede u vertikalni položaj od vodoravne. Formulacija i bilježenje reakcije padalina vrlo su skrupulozni. Rezultat se bilježi nakon pojave bijelog prstena na granici između antigena i antitijela. Ako reagirajući elementi reakcije odgovaraju jedni drugima, oni su vezani, ali to postaje vidljivo nakon dugog razdoblja njihove interakcije.
Reakcija taloženja se također izvodi u petrijevu zdjelici ili na klizaču, gdje se agarni gel prenosi primjenom malog sloja. Nakon što se očvrsne, mali se broj jažica izrezati u gel, u koji će se staviti antigeni i protutijela. Postoje dva načina za to: metoda radijalne imunodifuzije i dvostruke imunodifuzije.

Opće informacije

Mehanika rada oborina slično je uređaju aglutinacije. Pod utjecajem imunološkog seruma, antigen koji je već ušao u reakciju smanjuje stupanj disperzije. Važan uvjet je transparentnost seruma i antigena.
Poboljšati registraciju reakcije može biti ako slojevanje antigena na protutijela. Kao posljedica toga, može se promatrati pojavljivanje precipitata u obliku prstena. Taj se fenomen naziva precipitacije prstena i provodi se u posebnim epruvetama s promjerom od 2,5 do 3,5 mm. Jedan od najraširenijih primjera reakcije oborine je dijagnoza antraksa.
Precipitacija omogućuje određivanje razine toksigenosti kultura difterije u agaru.
U tijeku reakcije, dolazi do taloženja antigenskih kompleksa i protutijela. Precipitacija je imunološki fenomen koji omogućuje određivanje količine sadržaja antitijela u serumu pacijenta ili cijepljene osobe i životinja.

Učinak titracije

Važno je znati da podaci dobiveni titriranjem gore navedene metode nemaju kvantitativni izraz. Za izradu i analizu kvantitativne procjene sadržanog broja antitijela, M. Heidelberger i E. Kabat razvili su posebnu reakcijsku tehniku ​​temeljenu na traženju i identifikaciji zone ekvivalencije. Miješanje antigena povezanih s godinama s konstantnom količinom antiseruma dovodi do povećanja početnog taloga, a zatim opet smanjuje zbog povećanja sposobnosti otapanja kompleksa antigena. Nakon određivanja količine protutijela u supernatantu sadržanom u svakoj cijevi, može se ustanoviti da će u određenom broju posuda s antitijelima tekućina biti odsutna. Ovdje će se formirati najveći talog, u usporedbi s drugim epruvetama. Zbog toga i oduzimanje precipitata antigenskih proteina iz ukupnih vrijednosti proteina, moguće je dobiti točnu vrijednost sadržanih protutijela u volumenu posebno ispitivanog seruma. Nadalje, količina proteinskih molekula precipitata određena je količinom dušika ili kolorimetrijskim metodama.

Vrednovanje vrijednosti

Procjena vrijednosti oborine u dijagnostičkom metodologijom treba uzeti u obzir vjerojatnost prisutnosti imunološkog serumskih protutijela koja ne posjeduje imovinu precipitinsku, što znači da on ne može formirati talog nakon odgovora na antigene. Popis takvih molekula uključuje nepotpuna antitijela i neke vrste iz skupine gama-A-globulina.

Reakcija taloženja u laboratorijskim uvjetima pronalazi svoju primjenu u različitim modifikacijama. Na primjer, reakcija termoprecipitacije koristi se za otkrivanje bakterijskih botulinum antigena, antraksa itd., Koji se ne podvrgavaju termičkoj denaturaciji. Za razliku od taloženja prstena, slična vrsta reakcije koristi filtrate materijala koji se razmatraju u stanju kuhanja.
Analiza reakcije taloženja u složenoj smjesi ne omogućava karakterizaciju svojstava pojedinih elemenata smjese. U takvim slučajevima, osoba naselja na metodu oborina u agaru, a također koristi i imunoelektroforezu.

Padaline difuzne prirode

U ovom području istraživanja nalazi se koncept reakcije difuznih oborina (RAP). Temelji se na sposobnosti difundiranja u gel antitijelima i topljivim antigenima. Difuzija je sposobnost molekule određene tvari da prodre u druge molekule, što je uzrokovano toplinskim pokretom.
Gel je sustav disperziranog tipa, u kojem je tekuća faza ravnomjerno raspoređena u krutoj fazi. Najčešće za ovu reakciju upotrebljava se agarni gel.
Nakon davanja parametara, u stanju u kojem se molekule mogu difundirati jedna s drugom, njihov će sastanak biti praćen formiranjem kompleksa antigena + protutijela. To neoplazme može difundirati, dok je u gelu, a to će se istaloži, koja ima oblik trake, koje se može odrediti golim okom. U slučaju homologije antigena i antitijela, pojas neće nastati.
Stvaranje uvjeta u kojima će se difuzija odvijati u sloju agara uključivat će punjenje komponenti, ali ukupan broj rupa i njihov relativni položaj određuje se tipom problema koji treba riješiti. RAP omogućuje osobi da detektira i identificira nepoznate izolirane viruse koristeći studiju koja koristi poznati serum iz protutijela.

primjena

Oborine se naširoko koriste ne samo u dijagnozi bolesti, nego također pronalaze primjenu u forenzičnom liječničkom pregledu. Teško je predstaviti analizu u kojoj se može odrediti vrsta krvi pripadaju, dio organa ili tkiva koji se nalazi na ubojstvo oružja, što ne koristi reakciju padalina. Tijekom tog postupka koriste se precipitatirajući serumi, koji se dobivaju imunizacijom različitih životinja i ptica. Važno je da razina serumskog titra nije manja od 1: 10.000, a također mora imati dovoljno specifičnosti. Iz otkrivenog mjesta krvi ili njezinih korica napravi kapuljaču za fiz. Otopina koja će kasnije biti pogođena precipitiranim serumom. Prema ovoj reakciji moguće je utvrditi vrste tkiva i organskih proteina ljudi i životinja. Dobivanje zamućenih ekstrakata čini potrebnim pribjeći padavinama na agaru.

nalazi

Analizirajući pročitajte informacije, može se zaključiti da je reakcija taloženja izuzetno važno za osobu, jer oni omogućuju dijagnosticirati razne antigena pomoću protutijela, kao što je ovaj fenomen je naširoko koristi u forenzici i omogućuje identifikaciju krvnu grupu, tkiva ili organa u odnosu na određenu temu. Postoji nekoliko vrsta i metoda taloženja, koji se koriste u skladu s novim potrebama problema koji se rješava.